電泳緩沖液物性特點及作用

北京華科盛精細化工產品貿易有限公司生產銷售電泳緩沖液：
電泳緩沖液是核酸、蛋白質凝膠電泳系統的一個重要組成， 是電泳場中的導體，也是維持電泳系統恒定 pH值的必要條件。其成分及其離子強度影 響物質的電泳遷移率，應避免與被分離的樣 品發生化學反應而改變樣品的理化性質或使 其喪失生物活性。電泳緩沖液中的EDTA 可螯合Mg離子等二價陽離子，防止電泳時激 活DNA酶及Mg離子與核酸生成沉淀。 [1] 
中文名電泳緩沖液釋    義進行分子電泳時所使用的緩沖溶液作    用穩定體系酸堿度常見緩沖液TAE、TBE、TPE和MOPS等隸    屬核酸、蛋白質凝膠電泳系統特    點使用廣泛。

作用

緩沖液在電泳過程中的一個作用是維持合適的pH。電泳時陽極與陰極都會發生電解反應，陽極發生的是氧化反應（4OH--4e->2H2O+O2)，陰極發生的是還原反應（4H++4e->2H2)，長時間的電泳將使陽極變酸，陰極變堿。一個好的緩沖系統應有較強的緩沖能力，使溶液兩極的pH保持基本不變。
電泳緩沖液的另一個作用是使溶液具有一定的導電性，以利于DNA分子的遷移，例如，一般電泳緩沖液中應含有0.01-0.04mol/L的Na+離子，Na+離子的濃度太低時電泳速度變慢；太高時就會造成過大的電流使膠發熱甚至熔化。
電泳緩沖液還有一個組分是EDTA，加入濃度為1-2mmol/L，目的是螯合Mg2+ 等離子，防止電泳時激活 DNA酶，此外還可防止Mg2+離子與核酸生成沉淀。

特點

TAE是使用泛的緩沖系統。其特點是超螺旋在其中電泳時更符合實際相對分子質量（TBE中電泳時測出的相對分子質量會大于實際分子質量），且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩沖液快約10%，電泳大于13kb的片段時用TAE緩沖液將取得更好的分離效果，此外，回收DNA片段時也易用TAE緩沖系統進行電泳。TAE的缺點是緩沖容量小，長時間電泳（如過夜）不可選用，除非有循環裝置使兩極的緩沖液得到交換。
TBE的特點是緩沖能力強，長時間電泳時可選用TBE，并且當用于電泳小于1kb的片段時分離效果更好。TBE用于瓊脂糖凝膠時易造成高電滲作用，并且因與瓊脂糖相互作用生成非共價結合的四羥基酸鹽復合物而使DNA片段的回收率降低，所以不宜在回收電泳中使用。
TPE的緩沖能力也較強，但由于磷酸鹽易在乙醇沉淀過程中析出，所以也不宜在回收DNA片段的電泳中使用。